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制備一種耐高溫酶法合成菊粉的方法，其利用出芽胞桿菌為發(fā)酵菌種生產(chǎn)耐高溫菊粉合成酶，然后再利用耐高溫菊粉合成酶根據(jù)需要生產(chǎn)不同DP值菊粉，該方法的步驟為：⑴、培養(yǎng)出芽胞桿菌生產(chǎn)耐高溫菊粉合成酶：發(fā)酵原料經(jīng)高溫滅菌后打入種子罐及發(fā)酵罐中，出芽胞桿菌TKB28菌株經(jīng)過搖瓶、種子罐的二級(jí)接種后，按5%接種量接入發(fā)酵罐中，通入無菌空氣攪拌條件下，37℃恒溫發(fā)酵16小時(shí)左右，然后通過離心將菌體和發(fā)酵液分離，通過分子量20000的超濾膜濃縮菊粉合成酶溶液，測(cè)定所得菊粉合成酶濃縮液的酶活；發(fā)酵原料包Chemicalbook括：蔗糖200g；蛋白胨50g；無機(jī)鹽2g。蔗糖為碳源，蛋白胨為有機(jī)氮源，輔以少量無機(jī)鹽類形成發(fā)酵原料。⑵、合成菊糖反應(yīng)：在底物濃度為20%的蔗糖溶液、溫度為70℃條件下，按1?1.5U/mL的加入量加入高溫菊粉合成酶，初期pH值5.5，保溫8小時(shí)后當(dāng)蔗糖濃度小于5%時(shí)，調(diào)節(jié)pH為7.0，同時(shí)通過流加蔗糖使蔗糖濃度維持在5?10%，12小時(shí)后停止流加；當(dāng)反應(yīng)進(jìn)行4小時(shí)后溶液中主要為DP值9－12的菊糖和葡萄糖及少量蔗糖，當(dāng)12小時(shí)后反應(yīng)結(jié)束，溶液中主要為DP值21－25的菊糖和葡萄糖；